Quantification of Melittin in Iranian Honey Bee (Apis mellifera meda) Venom by Liquid Chromatography-electrospray Ionization-ion Trap Tandem Mass Spectrometry (LC-ESI-IT-MS/MS)

Document Type: Short Communication

Authors

1 Department of Chemistry, Imam Khomeini International University (IKIU), Qazvin, Iran

2 Department of Physico Chemistry, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran

Abstract

The current research aimed to quantify melittin (MEL) in Iranian honey bee (Apis mellifera meda) venom. To this end, a liquid chromatography-electrospray ionization-ion trap tandem mass spectrometry (LC-ESI-IT-MS/MS) approach was employed. Melittin is the main toxic peptide of honey bee venom with various biological and pharmacological activities. It was extracted with pure water from the bee venom samples. The analyses were performed on XBridge BEH300 C4 column using a gradient method with the mobile phase consisting of ultrapure water and acetonitrile (containing 0.1% formic acid). Signals of the melittin were recorded with the selected reaction monitoring (SRM) mode, which is a quantitative approach capable of quantifying analyte peptides with high sensitivity and. The mass spectrum of MEL was obtained in the positive ion mode and the quantification analysis was performed using precursor to product ion transition of m/z 570.2/669.9. This method demonstrated good linearity (R2˃0.997) in the range of 1-100 µg mL-1, with a limit of quantification (LOQ) of 1.0 µg mL-1. The content of MEL in Iranian honey bee venom accounts for 43–55% of total dry weight. This method can be used to evaluate the quality and authenticity of bee venom samples for different therapeutic applications of MEL.

Keywords

Main Subjects


Article Title [French]

Quantification de la Mélittine dans le Venin des Abeilles Iraniennes (Apis mellifera meda) par Chromatographie en Phase Liquide- spectrométrie de Masse en Tandem avec Piège à L'ionisation-ion par Électronébuliseur (LC-ESI-IT-MS/MS)

Abstract [French]

Cette recherche visait à quantifier la mélittine (MEL) dans le venin des abeilles iraniennes (Apis mellifera meda). À cetteeffet, une approche basée sur une chromatographie en phase liquide- spectrométrie de masse en tandem avec piège à l'ionisation-ion par électronébuliseur (LC-ESI-IT-MS/MS) a été employée. La mélittine est le principal peptide toxique du venin d'abeille mellifère ayant diverses activités biologiques et pharmacologiques. Elle a été extraite à partir des échantillons de venin d'abeille avec de l'eau pure. Les analyses ont été effectuées sur une colonne XBridge BEH300 C4 en utilisant une méthode de gradient avec unephase mobile comprenant de l'eau ultrapure et de l'acétonitrile (contenant 0,1% d'acide formique). Les spectres de la mélittine ont été enregistrés avec le mode de surveillance de la réaction sélectionné (SRM), qui est une approche quantitative capable de quantifier les peptides d’analyte avec une sensibilité élevée. Le spectre de masse de la MEL a été obtenu en mode ion positif et l’analyse de quantification a été effectuée utilisant un précurseur pour produire une transition ionique de m/z 570,2/669,9. Cette méthode a démontré une bonne linéarité (R2> 0,997) dans la gamme de 1-100 µg mL-1, avec une limite de quantification (LOQ) de 1,0 µg mL-1. Le contenu de la MEL dans le venin d'abeille iranien compte 43 –55% du poids sec total. Cette méthode peut être utilisée pour évaluer la qualité et l'authenticité d'échantillons de venin d'abeille pour différentes applications thérapeutiques de la MEL.

Keywords [French]

  • Apis mellifera meda
  • Venin d'abeille
  • Mélittine
  • Peptide
  • LC-ESI-IT-MS/MS
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